Anti-OMP – Neurociencias (prueba olfativa)

La supervivencia de muchos animales altriciales depende del sentido del olfato. La detección del olor está ligada a la gran familia de receptores olfativos (ORs) expresados en las neuronas olfativas sensoriales (OSNs) que se encuentran en el neuroepitelio entre la nariz. La unión de las moléculas de olor a los receptores olfativos ocasiona el incremento intracelular de los niveles del Adenosín Monofosfato cíclico (AMPc), seguidos de la activación de la proteína olfatoria G (Golf) y el tipo III de Adenil Ciclasa (ACIII). Los receptores olfatorios están acoplados a la proteína G, la cual se disocia en el momento de la unión al odorante. La subunidad α de la proteína G activa la adenilato ciclasa para que catalice la producción de AMPc. El AMPc actúa como un segundo mensajero para abrir los canales catiónicos. La difusión hacia adentro de Na+ y Ca+ produce despolarización.

Tipo transporte y almacenamiento: Se debe transportar refrigerado, NO en hielo seco. No puede bajar a menos de -20°C. Al almacenarse se deber mantener a -20°C, como mínimo. Este antisuero es diluido 1:1 con glicerol, el cual contiene 0.05% de Azida sódica para facilitar su transporte a temperatura ambiente.

Anti-OMP proviene de cabra a la cual se le hacen múltiples inmunizaciones con proteína olfatoria marcadora de roedores. Este antisuero tiene una especificidad muy alta por neuronas olfatorias maduras, sus axones y secciones de tejidos no olfatorios de algunos vertebrados como roedores, humanos, marsupiales y anfibios.

Es utilizado en Western Blotting e Inmunocitoquímica en diferentes diluciones:

Western Blotting: 1:50,000

Inmunocitoquímica: 1:200 para material embebido en parafina | 1:50,000 para secciones flotantes fijadas con Vectastain-Elite

Se recomienda hacer series de diluciones para establecer las condiciones óptimas. Las técnicas de fijación que se han utilizado con este antisuero son básicamente paraformaldehído, Bouin, Zamboni, acroleína y PLP Nakane. El Zamboni o el paraformaldehído al 4% parecen óptimos.