Kit para extracción de ADN TIS (Tejido Parenquimático)

Los radicales libres oxidan el ADN, los lípidos y las proteínas, afectando su función y causando mutaciones. El envejecimiento se caracteriza por una acumulación de estas moléculas dañadas, un deterioro progresivo de los mecanismos de reparación y degradación y como consecuencia, la aparición de enfermedades asociadas a la vejez. La oxidación del ADN puede provocar alteraciones en sus bases, como la formación de 8-hidroxiguanosina, utilizado como marcador de daño genético, o la rotura de la doble hélice, entre otras alteraciones.

Tipo transporte y almacenamiento: Refrigerado entre 2° y 10° C

El Kit para aislamiento de ADN TIS está especialmente diseñado para extraer ADN de tejido parenquimático de seres humanos y animales. Este kit se basa en un procedimiento que usa yoduro sódico (NaI) como agente caotrópico, el cual permite la extracción segura y sin el riesgo del uso de fenol/cloroformo. Este procedimiento de extracción utilizando yoduro sódico, causa menos oxidación de ADN y además tiene la capacidad de inhibir su oxidación mediante un Inhibidor de Oxidación. Este kit es muy útil para el análisis de 8-OHdG (8-hidroxi-2’-desoxiguanosina), el cual es un marcador de estrés oxidativo.

Materiales de ensayo

Los tejidos que pueden ser utilizados son los siguientes:

• Bazo
• Riñón
• Pulmón
• Páncreas
• Intestino delgado
• Hígado
• Estomago
• Testículos
• Cerebro
• Corazón

Características del Kit

• Útil para la detección y determinación del 8-OHdG, un marcador de estrés oxidativo.

• Inhibe la oxidación posterior del ADN mediante un Inhibidor de Oxidación.

• Adecuado para aplicaciones que requieren de la extracción de ADN de tejido parenquimático humano y animal.

Contenido del Kit

1) Solución de lisis - 75 mL X 2

2) Solución de reacción enzimática – 15mL X 1

3) Solución de ARNs – 50 µL X 1

4) Solución de digestión de proteínas – 750 µL X 1

5) Inhibidor de la Oxidación – 350 µL X 1

6) Solución de yoduro sódico – 15mL X 1

7) Solución de Alcohol – 30 mL X 1

8) Solución de Polietilenglicol – 20 mL X 1

Extracción de ADN de hígado de ratón y utilización del mismo en el ensayo de 8-OHdG

Se extrajo ADN de hígado de ratón utilizando los kits para extracción TIS (protocolo 1) catalogo 296-6770 y WB catalogo 291-50502. Las dos muestras de ADN obtenidas fueron digeridas hasta mononucleótidos con la nucleasa P1 (Penicillium citrinum) catalogo 145-08221 usando el kit 8-OHdG catalogo 292-67801. El 8-OHdG fue determinado mediante la utilización del reactivo de alta sensibilidad 8-OHdG catalogo 307-07921 (método ELISA) y la columna de cromatografía Wakopak Wakosil-II5C18RS 4.6*150mm catalogo 238-51471/ 234-51473.