Kit para aislamiento de microARN, Humano Ago2
Con este kit es posible preparar fracciones de microARN de alta pureza, que se unen a la proteína Argonauta 2 (hAgo2) mediante el método de Inmunoprecipitación utilizando el anticuerpo monoclonal anti-hAgo2. El miARN obtenido con este kit, contiene muy poca cantidad de contaminación de fragmentos de rARN y tARN.
Tipo transporte y almacenamiento: Temperatura 2-10°C, No Peligroso
Características:
- Alta purificación de miARN
- Específico para Ago2 Humano
- Baja contaminación de otros ARNs
El Kit contiene:
1. Solución – Esferas Anticuerpo Anti-Ago2 Humano - 1 vial x 500 µL
2. Solución para lisis celular 1 vial x 50 mL
3. Solución de elución a 1 vial x 500 µL
4. Solución de Ethachinmate 1 vial x 30 µL
5. Acetato de Sodio 3 mol/L 1 vial x 400 µL
Descripción y aplicación
El microARN (abreviado miARN o miRNA por sus siglas en inglés) es un ARN monocatenario que no codifica para proteínas, de longitud entre 21 - 25 nucleótidos y se encuentra en plantas, animales y algunos virus. Este mi ARN tiene la capacidad de regular la expresión genética mediante los siguientes procesos:
- degradación de la proteína durante la traducción
- inhibición de la elongación de la traducción
- terminación prematura de la traducción (disgregación de los ribosomas)
- inhibición de la iniciación de la traducción
Se sugiere que existen más de 1,000 tipos de miARN en seres humanos y ratones, varios científicos han identificado nuevos miARN con funciones aun no conocidas explicando que las funciones asociadas con enfermedades especificas han ido progresando alrededor del mundo. Recientemente, el descubrimiento de miARN en suero, ha abierto la posibilidad de utilizar miARN como Biomarcador incluso en enfermedades como el cáncer. Se considera que los microARN degradan la cadena de ARN mensajero (mARN) o inhiben la traducción de la siguiente manera:
- Los miARN se maduran a través de múltiples pasos en la célula y se incorporan en un complejo proteínico, llamado Complejo de Silenciamiento inducido por ARN (RISC), el cual está compuesto por miARN y proteínas de la subfamilia argonauta, las cuales son el principal componente de RISC, seguido por la unión a un mARN blanco.
Existen cuatro tipos de subfamilias Argonauta en humanos, hAgo1 a hAgo4, que se expresan simultáneamente aun cuando los niveles de expresión varían entre tipos. Dentro de estas familias, Ago2 es la que más se expresa y se considera que juega un rol muy importante en la cadena de reacción del miARN debido a que tiene la habilidad de cortar los ARNs blancos seleccionados. Mientras RISC se inmunoprecipita con anticuerpos contra estas proteínas Ago, el miARN puede ser recuperado de este precipitado RISC para ser estudiado y analizado.
¿Cómo funciona?
Características
1. Inmunoprecipitación de proteína endógena Ago
2. miARN altamente purificado se une a la proteína Ago
3. Baja contaminación de otros ARNs
4. Aplicable a clonación de microARN altamente eficiente y a microarrays con fracciones de microARN purificado.
Wako ofrece herramientas para analizar la función de los miARN, principalmente utilizando anticuerpos Anti-Ago2. La combinación de estas herramientas permite que se realicen análisis comprensivos de los miARNs y los mARNs que se encuentran en RISC que existen en células y tejidos.
Procedimiento:
Purificación de fracciones de microARN de diferentes líneas celulares:
